南美白对虾，是养殖面积最大的物种之一。作为主要的养殖甲壳类动物，南美白对虾的养殖规模在年全球产量为吨、.91亿美元。年韩国的产量为吨、产值为1.25亿美元；然而，这样产量不足以满足韩国的市场需求。
一、新型EHP病原体，在韩国出现
目前，对虾养殖行业主要困难之一是疾病，亚洲各国已经报道了各种导致对虾养殖过程中，造成死亡或生长缓慢的疾病，包括对虾肝胰腺微孢子虫病(hepatopancreaticmicrosporidiosis,HPM)，这是一种由微孢子虫（EHP）感染引起的生长缓慢的疾病。HPM于年首次被泰国报道称（也可感染斑节对虾)。
年，根据组织病理学、电子显微镜和系统发育分析，病原体被确定为一种新型寄生虫。迄今为止，斑节对虾、南美白对虾和文莱蓝虾（Litopenaeusstylirostris)是EHP的主要宿主，并在越南、印度、文莱、中国、印度尼西亚、马来西亚、委内瑞拉和澳大利亚[等地，发现大量病例。
EHP是一种寄生虫，具有两个生命阶段：一个细胞外阶段，在消化管管腔中的孢子期，以及许多定植于虾肝胰腺消化上皮细胞的细胞内孢子形成阶段。虽然EHP感染不会导致虾的较高死亡率，但它被认为是一种消耗性疾病，造成养虾场的产量下降，从而导致经济损失。
虽然有韩国在进口虾检测到EHP，但韩国国内对虾养殖场，尚发现该病原体的报道。但是在年4月，位于韩国仁川江华郡的一个养殖场发现，与前几年相比，南美白对虾的生长显着缓慢，虾在经过12周的养殖之后，大小只是正常虾大小的二分之一。这份EHP菌株，是韩国南美白对虾感染的第一份报告。因此，我们对样本进行了系统发育、组织病理学和电子显微镜分析，确定其病原体。
二、材料和实验方法
年4月，韩国仁川江华郡的南美白对虾养殖场，出现明显的生长缓慢。我们实地观察后发现，水体中未见白色粪便，这是严重感染EHP的常见临床体征；同时，在生长迟缓的虾中发现了空肠。因此，从养殖场随机采集体长3.7~9.3cm的虾，运送到实验室进行分子生物学、组织学和电子显微镜分析，以确定致病菌。
三、实验结果：
1、生长缓慢虾的观察
样本虾的体征，与正常虾之间存在很大差异，正常虾和样本虾的长度分别为8.5-9.3厘米和3.7-5.6厘米（图1A）。同时，与正常生长的虾相比，样本虾的肠道是空的（图1B）。
图1：样本虾与正常虾的对比
2、PCR检测与EHP感染分析
四个样本中的三个，在PCR反应中检测出EHP呈阳性。如图2所示。
图2：
3、在显微镜虾，观察生长缓慢的虾
肝胰脏消化小管内可见大量EHP。嗜酸性EHP在HE染色中大小为1.4-1.7μm，呈5.0-10.0微米的聚集EHP簇状(图3A，B)。这种分布在HE染色时更为明显。EHP在消化小管上皮细胞内大量分布，在细胞外也可检测到，表示寄生虫因细胞坏死、破裂而大量外泄(图3C，D)。大多数生长缓慢的虾，在肝胰腺间质组织中有浆液渗出，但在消化小管附近发现少量血细胞。
图3：感染EHP的南美白对虾的肝胰腺。
4、透射电子显微镜（TEM）观察
肝胰腺的TEM显示，成熟的EHP长度为1.4至1.7μm，具有卷曲极性细丝、后液泡、极质体、内生孢子(53.0nm)、电子致密外生孢子(12.0nm)和细胞核的典型特征（图4）。
图4：感染EHP的南美白对虾，肝胰腺的透射电子显微镜图像。
四、讨论
1、对样本虾进行组织病理学和分子生物学分析后发现，韩国江华郡发现的EHP分离株，是一种新菌株，与其他国家先前发现的EHP不同，它属于一个独立的分支。
2、经HE和Giemsa染色后发现，在消化小管上皮细胞内外均可见大量EHP，大小约为1.4~1.7μm。与细菌和真菌感染常见的现象（肉芽肿形成和血细胞浸润）相比，EHP感染的虾类肝胰腺间质组织中，仅观察到轻度浆液渗出，未见大量血细胞浸润。肝胰脏是虾营养代谢的中心，当肝胰脏严重感染EHP时，不仅会导致营养物质吸收失败，还会导致肝胰脏坏死，使成熟的EHP得以更广泛的传播。血淋巴中高水平的天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)，与严重感染EHP引起的肝胰腺细胞坏死和损伤有关，并在自然和实验感染EHP的虾中，都观察到这一现象。
3、EHP被认为是一种消耗性疾病，它会持续导致营养吸收和储存出现障碍，而没有明显的特征。最近，一项蛋白质组学研究确定了与生长缓慢虾的生长激素紊乱相关的生物标志物，这些生长激素的变化会导致免疫力下降和对其他疾病的易感性增加。此外，EHP和细菌的复合感染可诱发肉芽肿和败血性肝胰腺坏死，以及较高的死亡率。这表明复合感染会增加继发感染，导致疾病加重。
4、氨氮、亚硝酸盐等环境因子的变化，可触发EHP疾病的严重性。对虾养殖中，总氮和亚硝酸盐的安全浓度分别小于0.mg/L和0.mg/L。总氮和亚硝酸盐浓度高于1mg/L时，EHP将通过卤虫和多毛类进行水平传输。如果EHP疾病已经很严重，肝胰腺上皮细胞内EHP将很难清除，因此，目前还没有可用的药物来治疗。
所以在养殖当中，我们只能对该疾病进行适当管理，有效控制感染和防止其蔓延至关重要。防止发生EHP出现在养虾场，应众多
